Please use this identifier to cite or link to this item:
https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/29778
| Title: | การประเมินประสิทธิภาพอนุภาคนาโนจากพอลิเมอร์ประจุบวกในการนำส่งยีนสู่เซลล์ประสาทเพาะเลี้ยง |
| Other Titles: | Efficiency evaluation of cationic polymer-based nanoparticles for gene delivery into cultured neuronal cells |
| Authors: | เกวลิน คลังทอง |
| Advisors: | เทวิน เทนคำเนาว์ ณัฎฐิกา แสงกฤช |
| Other author: | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. คณะสหเวชศาสตร์ |
| Advisor's Email: | [email protected] ไม่มีข้อมูล |
| Subjects: | ยีนบำบัด ระบบประสาท -- โรค ระบบประสาทส่วนกลาง อนุภาคนาโน Gene therapy Nervous system -- Diseases Central nervous system Nanoparticles |
| Issue Date: | 2555 |
| Publisher: | จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย |
| Abstract: | ประเมินประสิทธิภาพของอนุภาคแม่เหล็กนาโน poly(methyl methacrylate) (PMMA) core/polyethyleneimine (PEI) shell nanoparticles (mag-PEI NP) เพื่อนำมาใช้เป็นตัวพาสำหรับการนำส่งยีนสู่เซลล์ประสาทเพาะเลี้ยง LAN-5 อนุภาค mag-PEI NP สังเคราะห์ด้วยวิธี one-step emulsifier-free emulsion polymerization โดยมีอนุภาคแม่เหล็กกระจายอยู่ในตัวพาร่วมกับหมู่เอมีนจากพอลิเมอร์ประจุบวก จากนั้นตรวจสอบคุณลักษณะทางเคมีกายภาพของตัวพาด้วยการวัดขนาดและหาค่าประจุของmag-PEI NP รวมทั้งทดสอบความสามารถในการจับดีเอ็นเอด้วย DNA binding assay และตรวจสอบรูปร่างลักษณะพื้นผิวโครงสร้างระดับอะตอมด้วย atomic force microscopy การประเมินประสิทธิภาพการนำส่งยีนของ mag-PEI NP ได้ทดสอบการนำส่งที่ช่วงเวลาต่างๆ เปรียบเทียบระหว่างการเหนี่ยวนำการนำส่งยีนด้วยแรงแม่เหล็กและปราศจากแรงแม่เหล็ก อีกทั้งได้ยืนยันการเคลื่อนที่เข้าสู่เซลล์ของ ตัวพาด้วย confocal laser scanning microscopy สภาวะที่ดีที่สุดได้ถูกนำมาใช้นำส่งยีนบำบัด tryptophan hydroxylase-2 (TPH-2) เข้าสู่เซลล์ LAN-5 และตรวจสอบการแสดงออกของยีนด้วยเทคนิค reverse-transcriptase polymerase chain reaction นอกจากนี้ ในงานวิจัยยังได้ศึกษาการเสริมประสิทธิภาพของตัวพาที่พัฒนา โดยใช้ TAT peptide ร่วมในระบบนำส่งยีนเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการนำส่งยีนให้ดียิ่งขึ้น |
| Other Abstract: | In this study, we evaluated the potential of magnetic poly(methyl methacrylate) (PMMA) core/polyethyleneimine (PEI) shell nanoparticles (mag-PEI NP) as the carrier for gene delivery into neurobalstoma cells (LAN-5). The mag-PEI nanoparticles were prepared by one-step emulsifier-free emulsion polymerization, generating highly loaded and monodispersed magnetic polymeric nanoparticles bearing an amine group. The physicochemical properties of the mag-PEI nanoparticles and DNA-bound mag-PEI nanoparticles were investigated using the DNA binding assay, atomic force microscopy and ζ-size measurements. The gene transfection efficiencies of mag-PEI nanoparticles were evaluated at different transfection times to compare between magnetic induction and non-induction. Confocal laser scanning microscopy confirmed intracellular uptake of the magnetoplex. The optimal conditions for transfection of TPH-2 were selected for therapeutic gene transfection. Finally, the mag-PEI nanoparticle magnetoplex was delivered into LAN-5 cells. Reverse-transcriptase polymerase chain reaction was performed to evaluate TPH-2 expression in a quantitative manner. Moreover, we also demonstrated the use of TAT peptide incorporated in our system was significantly enhanced gene transfection efficiency. |
| Description: | วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2555 |
| Degree Name: | วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต |
| Degree Level: | ปริญญาโท |
| Degree Discipline: | ชีวเคมีคลินิกและอณูทางการแพทย์ |
| URI: | http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/29778 |
| URI: | http://doi.org/10.14457/CU.the.2012.1402 |
| metadata.dc.identifier.DOI: | 10.14457/CU.the.2012.1402 |
| Type: | Thesis |
| Appears in Collections: | All - Theses |
Files in This Item:
| File | Description | Size | Format | |
|---|---|---|---|---|
| kewalin_kl.pdf | 4.02 MB | Adobe PDF | View/Open |
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.