การตรวจหาเมทิลเลชันบนโปรโมเตอร์ของยีน HCP5 HPC5 และ TNFRSF8 ในมะเร็งปากมดลูก

Abstract

มะเร็งปากมดลูกเป็นมะเร็งที่พบมากที่สุดเป็นอันดับสามในสตรีทั่วโลกและเกิดขึ้นบ่อยในสตรีอายุน้อยกว่า 25 ปี สาเหตุของมะเร็งปากมดลูกเกิดจากการติดเชื้อ human papillomavirus 16 และ 18 (HPV16 และ HPV18) ซึ่งติดต่อผ่านทางผ่านทางเพศสัมพันธ์ สาเหตุการเกิดมะเร็งไม่เพียงแค่การติดเชื้อ HPV แต่ยังรวมถึงในระดับโมเลกุล ในงานครั้งนี้ศึกษาดีเอ็นเอเมทิลเลชันของ HCP5, HPC5 และ TNFRSF8 โดย DNA methylation วิธี Methylation primer PCR (MSP - PCR) และ RT - PCR สำหรับศึกษาการแสดงออกของยีนเหล่านี้ ในการศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างเมทิลเลชันกับการแสดงออกของยีนใช้ HeLa ซึ่งเป็นเซลล์สายพันธุ์มะเร็งปากมดลูก เลี้ยงในอาหารโดยใส่ยา 5'Azacytidine ผลการศึกษาพบว่ามีเพียง TNFRSF8 ที่สามารถศึกษาการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชันในมะเร็งปากมดลูกและเซลล์ปากมดลูกปกติ จาก เซลล์มะเร็งปากมดลูก 45 ตัวอย่างและเซลล์ปกติ 36 ตัวอย่าง พบดีเอ็นเอเมทิลเลชันในเซลล์มะเร็งปากมดลูก 68.88% และตรวจพบเมทิลเลชันควบคู่กับอันเมทิลเลชันในเซลล์ปากมดลูกปกติ 44.44% สำหรับความสัมพันธ์ระหว่างการเกิดดีเอ็นเอเมทิลเลชัน และการแสดงออกของยีน ผลพบว่าเมทิลเลชันลดลงเมื่อ เลี้ยง เซลล์ HeLa ร่วมกับ 5'Azacytidine แต่ ในการทดลองเพื่อตรวจสอบการแสดงออกของยีนปรากฏว่าผลการทดลองล้มเหลว ทำให้ไม่สามารถตรวจสอบได้ ผลจากการศึกษาในยีน HCP5 ตรวจพบเมทิลเลชันทั้งในเซลล์ HeLa และเซลล์เม็ดเลือดขาว จึงตัดยีนนี้ออกจากการทดลอง ผลจากการศึกษาในยีน HPC5 ไม่สามารถหาลำดับนิวคลิโอไทด์ได้จากฐานข้อมูลทั้งหมด ดังนั้นจึงไม่สามารถทำการทดลองได้ จากผลทั้งหมดแสดงให้เห็นว่า TNFRSF8 อาจจะเป็นยีนต้านมะเร็งในมะเร็งปากมดลูกในขณะที่ HCP5 นี้ไม่ใช่ และ HPC5 เป็น novel gene ที่จำเป็นต้องศึกษาเพิ่มเติมเพื่อยืนยันว่ามีอยู่จริง