Please use this identifier to cite or link to this item:
https://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/45972
Title: | DEVELOPMENT OF B/Z-DNA NANOBIOSENSOR FOR DETECTION OF Z-DNA BINDING PROTEINS |
Other Titles: | การพัฒนา บี/ซี-ดีเอ็นเอ นาโนไบโอเซนเซอร์สำหรับตรวจวัดโปรตีนที่สามารถจับกับซี-ดีเอ็นเอ |
Authors: | Kulwadee Sawatpaiboontawee |
Advisors: | Vorasit Vongsutilers Bodin Tuesuwan |
Other author: | Chulalongkorn University. Faculty of Pharmaceutical Sciences |
Advisor's Email: | [email protected] [email protected] |
Subjects: | Biosensors Surface plasmon resonance Z-DNA ไบโอเซนเซอร์ เซอร์เฟซพลาสมอนเรโซแนนซ์ ซี-ดีเอ็นเอ |
Issue Date: | 2014 |
Publisher: | Chulalongkorn University |
Abstract: | The left-handed Z-DNA has been attempted to elucidate the biological significance since several research studies suggest correlation between the Z-DNA and pathogenesis of many diseases, for example, systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, and Alzheimer's disease. Because protein–DNA interaction can control various biological processes, studying of the interaction between Z-DNA and Z-DNA binding proteins is the key to understand biological role of Z-DNA. In this study, B/Z-DNA nanobiosensor was designed and developed to determine the binding of Z-DNA forming probe to specific Z-DNA binding proteins under surface plasmon resonance (SPR) technique detection. Z-DNA forming probe was designed to contain the Z-DNA facilitator, 5-methylcytosine, in an alternating cytosine-guanine tract. The circular dichroism results have demonstrated the designed Z-DNA forming probe could convert to the left-handed conformation and specifically bind to Z-DNA specific binding protein. After B/Z-DNA biosensor development, DNA hybridization study and DNA-protein binding study on surface were investigated. All SPR results have presented the complete of DNA immobilization process and the B/Z-DNA biosensor can hybridized specifically to complementary target. This study provided the optimal SPR condition for DNA hybridization study, nevertheless, the SPR condition for study of DNA- protein binding on biosensor surface needs further optimization. |
Other Abstract: | ซี-ดีเอ็นเอได้ถูกค้นพบและได้รับความสนใจในการค้นหาบทบาทและความสำคัญในระบบชีวภาพ เนื่องจากมีหลักฐานการศึกษาเกี่ยวกับความสัมพันธ์ระหว่างซี-ดีเอ็นเอและพยาธิกำเนิดของโรคต่างๆ อาทิเช่น โรคเอสแอลอี, โรคข้ออักเสบรูมาตอยด์ และโรคอัลไซเมอร์ เป็นต้น กระบวนการทำงานบางอย่างในร่างกายถูกควบคุมจากการเกิดการจับกันระหว่างโปรตีนและดีเอ็นเอ ดังนั้นการศึกษาการเกิดอันตรกิริยากันระหว่างซี-ดีเอ็นเอและโปรตีนที่สามารถจับกับซี-ดีเอ็นเอเป็นหัวใจสำคัญในการเข้าใจถึงบทบาทหน้าที่อันแท้จริงของซี-ดีเอ็นเอในระบบชีวภาพ งานวิจัยนี้ได้ทำการศึกษาออกแบบและพัฒนาบี/ซี-ดีเอ็นเอ นาโนไบโอเซนเซอร์เพื่อตรวจสอบการจับยึดกันระหว่างดีเอ็นเอที่มีความสามารถในการเปลี่ยนรูปร่างเป็นซี-ดีเอ็นเอและโปรตีนที่สามารถจับกับซี-ดีเอ็นเอได้อย่างจำเพาะเจาะจง เช่น ซี-ดีเอ็นเอแอนติบอดี ซึ่งอาศัยหลักการตรวจวัดด้วยเทคนิคคลื่นผิวพลาสมอน โดยสายโอลิโกนิวคลีโอไทด์ถูกออกแบบให้มีการดัดแปลงโครงสร้างของเบสไซโตซีนในส่วนของลำดับเบสที่มีการจัดเรียงเป็นไซโตซีนสลับกับกวานีนเพื่อช่วยส่งเสริมให้เกิดการเปลี่ยนแปลงรูปร่างของดีเอ็นเอง่ายขึ้น ซึ่งจากผลการศึกษาพบว่า สายโอลิโกนิวคลีโอไทด์ที่ออกแบบนั้นสามารถในการเปลี่ยนรูปร่างเป็นซี-ดีเอ็นเอและจับกับโปรตีนที่สามารถจับกับซี-ดีเอ็นเอได้อย่างจำเพาะเจาะจง เมื่อนำมาพัฒนาเป็นบี/ซี-ดีเอ็นเอ ไบโอเซนเซอร์พร้อมทั้งศึกษาเกิดการไฮบริไดเซชั่นกับดีเอ็นเอและการจับกันระหว่างดีเอ็นเอและโปรตีนพื้นผิวของไบโอเซนเซอร์ พบว่า ผลการศึกษาแสดงให้เห็นว่ากระบวนการตรึงสายโอลิโกนิวคลีโอไทด์ลงบนพื้นผิวทองของไบโอเซนเซอร์เกิดขึ้นได้อย่างสมบูรณ์ และสายโอลิโกนิวคลีโอไทด์บนพื้นผิวของไบโอเซนเซอร์สามารถเกิดไฮบริไดเซชั่นกับดีเอ็นเอที่มีลำดับเบสคู่สมได้อย่างจำเพาะเจาะจง การศึกษานี้สามารถพัฒนาสภาวะที่เหมาะสมในการศึกษาการเกิดไฮบริไดเซชั่น แต่อย่างไรก็ตามสภาวะที่เหมาะสมในขั้นตอนการศึกษาการจับกันระหว่างดีเอ็นเอและโปรตีนพื้นผิวของไบโอเซนเซอร์ยังคงต้องพัฒนาเพื่อให้ได้สภาวะที่เหมาะสมต่อไป |
Description: | Thesis (M.Sc. in Pharm.)--Chulalongkorn University, 2014 |
Degree Name: | Master of Science in Pharmacy |
Degree Level: | Master's Degree |
Degree Discipline: | Pharmaceutical Chemistry |
URI: | http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/45972 |
URI: | http://doi.org/10.14457/CU.the.2014.290 |
metadata.dc.identifier.DOI: | 10.14457/CU.the.2014.290 |
Type: | Thesis |
Appears in Collections: | Pharm - Theses |
Files in This Item:
File | Description | Size | Format | |
---|---|---|---|---|
5476201133.pdf | 5.71 MB | Adobe PDF | View/Open |
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.